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嗜热真菌Thermomyces lanuginosus A236热稳定葡萄糖淀粉酶的纯化及其特性

2018-01-08 18:053560菌物学报
【作者】杨依军;李多川;严琨;彭友良;沈崇尧;
【机构】天津市植物保护研究所!天津 300112;山东农业大学植保系!山东泰安 271018;中国农业大学植物科技学院!北京 100094;
【摘要】嗜热真菌ThermomyceslanuginosusA236在液体培养基中50℃下静止培养14天,粗提酶液经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Toyopearl离子交换层析、Butyl-Toyopearl疏水层析、SephacrylS100凝胶过滤和FPLCMonoQ离子交换层析,得到了凝胶电泳均质的葡萄糖淀粉酶。酶促反应产物经TLC分析为葡萄糖,证明纯化的酶为葡萄糖淀粉酶(EC3.2.1.3)。SDS-PAGE测定其分子量为72,000,不具亚基,PI为4.0,富含Val和Leu。酶反应最适温度和pH分别为70℃和5.0。在pH5.0条件下,酶在60℃保温1h,仍具有原酶活性。酶活性在70℃和80℃的半衰期分别为20min和6min。Ca2+对酶有激活作用,Fe3+、Al3+、Hg2+等金属离子对酶活力有一定的抑制作用。纯酶碳水化合物含量为12.4%。纯酶可水解可溶性淀粉、直链淀粉、支链淀粉、糊精、糖原、麦芽三糖和麦芽糖,其中可溶性淀粉为最适底物。   
【关键词】嗜热真菌;Thermomyceslanuginosus;葡萄糖淀粉酶;
【基金】国家教委高校博士点基金;
【分类号】Q949;
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