平菇菌种复壮技术

　    平菇孢子分离复壮技术：
　　同一平菇品种经过四年以上栽培就会表现出一些退化现象。如出菇迟，长势弱，转潮慢，产量不高等。通过平菇有性繁殖所产生的孢子进行母种繁殖是解决种性退化的一条有效途径。因平菇子实体孢子弹射量大，接种操作简易，在栽培专业户中推广孢子分离提纯复壮技术是可行的。
　　１．母种孢子分离与接种
　　（１）采菇。选择菇体形态好，生长势健壮，并能代表该品种性状接近成熟的平菇子实体，采摘一丛或两丛作为复壮用种菇拿回室内备用。要求所采的子实体菌盖边缘稍卷或已接近平展。
　　（２）装置与灭菌。用0.2%新洁尔灭清洗干净3个1000毫升烧杯和3个培养皿，烘干水分后将培养皿放入烧杯底部。切取菌盖长达7-9厘米上层或中层的一朵平菇子实体，用药棉蘸75%酒精轻擦菌盖和菌柄后，将菌褶朝下放入烧杯中的培养皿中如有插菇钢丝架更好。此操作完成后在烧杯口沿上盖好用无菌水滴湿的4层沙布，上面再盖一层白纸，用皮筋扎口，以次类推连同3个同样处理的烧杯一起放入接种箱。接种箱中另放入30-40支PDA试管培养基，接种铲、镊子酒精灯等工具，用10毫升甲醛加6克高锰酸钾混合后对接种箱进行熏蒸消毒灭菌。
　　（３）接种与培养。放入接种箱用于孢子分离的平菇，经过8-12小时后就有孢子弹出，一般放一昼夜培养皿中就有厚厚一层白色孢子印，这时要及时进行接种。接种时双手用75%酒精擦洗后就可进行。先取掉烧杯口上覆盖的纸和纱布，再用镊子夹出平菇体，取出培养皿用左手食指和母指夹住皿体，再取一支试管培养基用左手小指和无名指夹住。右手持接种铲竖着在酒精灯上灼烧进行干热灭菌，待冷却后用右手小指及鱼际拔出试管棉塞，用接种铲从培养皿中央铲取一些孢子接在试管培养基中央，随即塞上棉塞即可。一朵菇体弹射的孢子量可接种10支以上试管种。接种完成后贴上标签放入２５℃左右的恒温箱中培养。培养过程中，前3-4天为孢子定植期，外表看不出任何变化，7天以后孢子开始萌发并在四周长出白色绒毛状菌丝体，16-18天左右菌丝布满培养基面，即得纯菌丝母种。如有污染管应及时弃除。
　　２．原种扩接
　　选取10支菌丝洁白、粗壮、生长整齐的试管种进行原种的扩接。另20支纯菌丝母种等做完出菇试验后再作留种及相关处理。一支试管种可接5瓶原种，每支试管接完要进行火焰干热灭菌后再扩接另一支试管。接种完毕后取出菌种瓶放入25℃左右恒温箱培养，菌丝满瓶后10天左右进行出菇试验。
　　３．出菇试验
　　用常规棉籽壳等培养基。一般接种10-20袋即可。接种后在适宜温度下发菌，菌丝长满后移到出菇最佳条件下进行观察。选菌丝生长速度快，吃料能力强，出菇早，朵形好，转潮快，产量高，质量好，遗传性状稳定的平菇菌种所出的子实体再进行组织分离培养，方可用于栽培生产。下面具体介绍一下组织分离方法。
        组织分离的操作要点：
        1.在菇床、菌墙中选择出菇早、无杂菌侵染、株型紧凑、圆整肉厚、色泽美观、七八成熟的第一潮菇的肥壮菇体作种菇；
　　2.在种菇中部取最大的3-4张菇片，用70%的酒精轻擦表面后置于接种箱内消毒；
　　3.将菇片纵向撕开，在每个裂面靠近菇片边缘处取一米粒大小的菇肉组织接于马铃薯麸皮培养基上。每张菇片共撕10个裂面，接10支试管，一次分离共接30-40支试管；
　　4.将试管置于15-30℃下培养；
　　5.培养期间每天都要检查发菌情况，从中选择菌丝浓白粗壮、边缘整齐、长速正常、无绿、黄及浆糊状等杂菌斑点的，表现最好的分离种转接于木屑麸皮培养基上，于15-30℃下培养；
　　6.菌丝发满后，在接种箱内去掉棉塞，用蜡封口，用黑膜包裹后于4-9℃的冰箱内保藏；
　　7.在下一个生产季节与原始保藏种作对比试验，择优作为生产用种。每季都如此复壮，能逐步提高菌种各方面的性状，使发菌加快，抗逆抗杂性增强，质量明显提高。