【作者】苏豫陈依军车永胜刘钢
【机构】中国药科大学化学生物学研究室军事医学科学院毒物药物研究所抗毒药物与毒理学国家重点实验室中国科学院微生物研究所真菌学国家重点实验室
【摘要】己糖激酶在真菌中广泛存在,参与葡萄糖磷酸化等生理过程。本文从头孢菌素产生菌顶头孢霉中克隆并鉴定了一个己糖激酶编码基因,命名为Achka。通过RT‐PCR证明Achka含有4个内含子,其推测的编码蛋白含有484个氨基酸,分子量为53.7k Da。在顶头孢霉中敲除Achka后发现,突变株在以果糖、蔗糖或甘露糖为唯一碳源的培养基上生长受到严重限制。我们在大肠杆菌中异源表达了Achka,并对表达的重组蛋白AcHKA进行了分离纯化。酶学动力学分析表明,AcHKA对果糖的最大反应速率要大于葡萄糖,但是却对葡萄糖有更高的亲和力。上述结果进一步证明AcHKA为己糖激酶,在顶头孢霉体内主要负责果糖、蔗糖和甘露糖等的代谢。
【基金】国家自然科学基金(31470177)~~；
【关键词】顶头孢霉; 己糖激酶; Achka; 己糖利用;