【作者】孙晓红 冯爱萍 陈明杰 潘迎捷
【机构】南京农业大学生命科学学院 上海市农业科学院食用菌研究所 上海水产大学 南京210095上海市农业科学院食用菌研究所 上海201106上海200090
【摘要】利用差异显示技术分离获得草菇低温特异DNA片段,经与正常草菇和低温诱导草菇cDNA分别southern杂交验证后,得到低温特异性片段。采用PCR标记技术对获得的低温特异性片段进行DIG标记,以此为探针,对低温处理的草菇cDNA文库进行筛选,获得4个阳性克隆,分别进行测序。序列同源性比较分析发现,Cor3基因与s-腺苷-L-高半胱氨酸水解酶有很高的同源性,Cor4基因与40S核糖体蛋白S9有很高的同源性,这两个基因可能与草菇的低温自溶现象有关。Cor1基因与脉孢菌的保守假设蛋白(conservedhypotheticalprotein)有同源性,Cor2基因与辅酶A连接酶有同源性。半定量RT-PCR验证发现Cor1和Cor2基因在正常情况下没有表达,低温处理后有表达,Cor3和Cor4基因在正常情况下有表达,低温处理后表达量增加。
【基金】上海市科学技术发展基金资助； 项目编号:003912076；
【关键词】低温特异性片断; 低温cDNA文库; 半定量RT-PCR;