林新坚; 江秀红; 蔡海松; 郑永标; 林陈强
福建省农业科学院土壤肥料研究所; 福建省农产品质量安全检验检测中心; 福建省农业科学院土壤肥料研究所; 福建省农业科学院土壤肥料研究所; 福建省农业科学院土壤肥料研究所 福州350013; 福州350003; 福州350013; 福州350013; 福州350013
【中文摘要】 为了建立稳定的姬松茸(Agaricus blazei Murill)简单序列重复区间(Inter-Simple Sequence Repeats,ISSR)分子标记技术体系,笔者通过单因子试验分别研究了模板DNA、Mg2+浓度、dNTP、引物浓度和Taq酶用量对姬松茸ISSR-PCR扩增的影响,确定了姬松茸ISSR分析的最佳PCR条件为:25μL反应体系中,模板DNA20ng,引物0.75μmol/L,dNTP200μmol/L,Mg2+2.0mmol/L,Taq DNA polymerase 1.5U。并应用该优化体系筛选到6个适合姬松茸ISSR-PCR扩增的引物,为利用ISSR标记技术研究姬松茸的种质资源提供了参考。
【英文摘要】 Single factor testing was used to determine the optimal concentrations of DNA template,primer,dNTP,Mg2+ and Taq DNA polymerase for PCR amplification of inter-simple sequence repeats(ISSR)in order to establish a stable ISSR-based molecular marker system for Agaricus blazei Murrill.The reaction mixture for optimum amplification contained:20 ng DNA template,0.75 μmol/L primer,200 μmol/L dNTP,2.0 mmol/L Mg2+ and 1.5 U Taq DNA polymerase.Six primers suitable for PCR amplification of ISSR markers from A.blazei were selected using this system.Our data has important implications for A.blazei germplasm analysis.
【中文关键词】 姬松茸; 简单序列重复区间; 体系优化; 单因子试验
【英文关键词】 Agaricus blazei; Inter-simple sequence repeats(ISSR); System optimization; Single factor test
【基金】福建省科技厅项目“姬松茸低镉品种选育”(编号2002I010);; 福建省财政专项“福建省农业科学科技创新团队建设基金”(STIF-Y01)的部分研究内容
【文献出处】 食用菌学报,Acta Edulis Fungi,编辑部邮箱,2007年04期 【DOI】CNKI:SUN:SYJB.0.2007-04-007