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香菇SRAP扩增体系的建立与优化

2010-05-17 09:351840

付立忠; 魏海龙; 李海波; 吴庆其; 吴大丰; 吴学谦
浙江省林业科学研究院生物技术研究所; 浙江省林业科学研究院生物技术研究所; 浙江省林业科学研究院生物技术研究所; 浙江省林业科学研究院生物技术研究所; 丽水市食用菌研究开发中心; 浙江省林业科学研究院生物技术研究所 杭州310023丽水市食用菌研究开发中心; 浙江益圣菌物发展有限公司; 丽水323000; 杭州310023丽水市食用菌研究开发中心; 浙江益圣菌物发展有限公司; 丽水323000; 杭州310023丽水市食用菌研究开发中心; 浙江益圣菌物发展有限公司; 丽水323000; 杭州310023丽水市食用菌研究开发中心; 浙江益圣菌物发展有限公司; 丽水323000; 浙江益圣菌物发展有限公司; 丽水323000; 杭州310023丽水市食用菌研究开发中心; 浙江益圣菌物发展有限公司; 丽水323000

【中文摘要】 为了建立稳定的香菇(Lentinula edodes)SRAP(sequence-related amplified polymorphis m,相关序列扩增多态性)分子标记技术体系,以香菇(Lentinula edodes)为材料,采用SDS-CTAB(sodium dodecyl sulfate-cetylri methylammoniumbromide)法提取菌丝体基因组DNA,用琼脂糖检测扩增产物,筛选优化了SRAP扩增条件。可用于香菇SRAP分析的最佳PCR条件为20μL PCR反应体系中,模板DNA25ng,Buffer l×,Mg2+2.5mmol/L,dNTP Mixture0.2mmol/L,引物0.4μmol/L,Taq DNA聚合酶1.5U。优化后的SRAP体系目标条带增多,重现性好。

【中文关键词】 香菇; 分子标记; 扩增体系优化; SRAP
【基金】浙江省重点攻关项目“香菇种质资源保存利用与快速分类鉴定关键技术研究”(编号:2005C22057);; “生物技术在林木共生菌菌种快速分离鉴定上的应用研究”(编号:2004C22032);; 院所重大研发专项“森林食药用真菌DNA指纹图谱构建及其应用研究”(编号:2006F11003)的部分研究内容

【文献出处】 食用菌学报,Acta Edulis Fungi,编辑部邮箱,2006年04期 【DOI】CNKI:SUN:SYJB.0.2006-04-002

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