农杆菌介导的刺芹侧耳遗传转化体系的建立

【作者】盛立柱 宋冰 戴月婷 李丹 付永平 李玉
【机构】吉林农业大学农学院 吉林农业大学食药用菌教育部工程中心
摘要：以刺芹侧耳菌丝球为受体,潮霉素(Hyg)为筛选标记,应用农杆菌介导法对刺芹侧耳菌丝进行了遗传转化研究。潮霉素敏感性测试结果表明,刺芹侧耳Hyg耐受浓度为50mg/L。农杆菌介导的刺芹侧耳菌丝最佳遗传转化体系为:菌液浓度OD600=0.6–0.7,侵染时间30–35min,共培养时间2d,侵染液和共培养培养基中乙酰丁香酮(AS)浓度为1mg/m L;经潮霉素抗性筛选、PCR鉴定和GUS活性的组织化学分析,表明外源基因GUS已转入到刺芹侧耳菌丝中,并获得表达。本实验成功地建立了稳定的农杆菌介导的刺芹侧耳遗传转化体系。
基金：国家重点基础研究发展计划(2014CB138305)； 国家自然基金项目(31471926)； 省技厅项目(20140101149JC)；
关键词：刺芹侧耳; 菌丝球; 农杆菌; GUS染色; 转化体系;