杂色云芝漆酶基因(Lcc1)的克隆及在甲醇毕赤酵母中的表达

【作者】郭梅 蒲军 杜连祥 路福平 白东清

【机构】天津科技大学生物工程学院工业微生物重点实验室,天津科技大学生物工程学院工业微生物重点实验室,天津科技大学生物工程学院工业微生物重点实验室,天津科技大学生物工程学院工业微生物重点实验室,天津科技大学生物工程学院工业微生物重点实验室 天津300222天津农学院食品科学系天津300384,天津300222,天津300222,天津300222,天津300222天津农学院水产系天津300384

【摘要】以白腐菌杂色云芝Coriolus versicolor RNA为模板,通过RT-PCR获得漆酶Leel基因的cDNA片段。构建了甲醇酵母表达质粒pmeta-Lccl载体,并将其线性化后用电穿孔法导入Pichia methabolica PMAD16,部分阳性克隆的PCR结果表明Lccl基因已经整合到甲醇毕赤酵母染色体上,经摇瓶培养筛选出表达水平较高的酵母工程菌株。漆酶酶活力达53U/L 

【关键词】cDNA; 载体的构建; 异源表达;

重组质粒pmeta一Lccl的酶切鉴定

异源表达;重组酵母基因组DNA