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粉棒束孢几丁质酶基因cDNA全序列克隆及结构特征分析

2018-06-19 17:381660菌物学报
【作者】黄勃 张中 彭凡 樊美珍 李增智
【机构】安徽农业大学微生物防治省重点实验室安徽农业大学微生物防治省重点实验室 合肥230036
【摘要】通过设计基因保守区的特异性简并引物,运用SMARTRACERT-PCR技术,首次从粉棒束孢中克隆出完整的几丁质酶基因。该基因cDNA全长1549bp,5’端非翻译区89bp,3’端非翻译区有188bp,开放阅读框(ORF)1272bp,编码423个氨基酸。信号肽长度为22个氨基酸。信号肽很可能需要两次剪切。成熟的蛋白理论分子量为43.9kDa,理论等电点为5.67。氨基酸序列具有几丁质酶18族的两个高度保守的活性区域,一个是酶作用活性位点,另一个是几丁质结合区域。该蛋白可归于几丁质酶18族V类。成熟蛋白的氨基酸序列与裂虫壳AAV98691、白色扁丝霉CAA45468、菌生轮枝孢AAP45631、莱氏野村菌AAP04616和球孢白僵菌AAN41261的同源性分别为91%,89%,80%,76%和75%。
【基金】安徽省自然科学基金项目(00042208); 安徽省优秀青年科技基金(04041043); 新世纪优秀人才支持计划(05-0560)共同资助;
【关键词】虫生真菌; 胞外分泌酶; 粉拟青霉;
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