草菇噬菌体基因文库的构建
The Construction of Genomic DNA Library of Volvariella volvacea by Lambda GEM- 11 Phage
李南羿 姚占芳 陈明杰
摘 要：采用CTAB/NaCl法提取草菇基因组DNA,通过限制性内切酶Sau 3AI对纯化的草菇基因组DNA进行部分酶切,获得大小为20kb左右的DNA片段.这些DNA片段再次纯化后,与经Eco R I和Bam H I双酶切消化的Lambda GEM-11噬菌体DNA载体臂相连,以大肠杆菌(E.coli)LE392为寄主细胞,构建了草菇(Volvariella volvacea)基因文库,所构建基因文库效价为1.5×105 pfu/mL.
关键词：草菇;噬菌体;基因文库
分类号：S646 文献标识码：A
基金项目：本项目由上海市农委科技攻关重点项目资助,项目编号:农科攻字(98)第01-14号
作者简介：陈明杰,本文的通信作者.Email:mingjiechen@china.com
作者单位：李南羿（河南农业大学微生物教研室,郑州,450002）
姚占芳（河南农业大学微生物教研室,郑州,450002）
陈明杰（农业部食用菌遗传育种重点开放实验室,上海市农业遗传育种重点开放实验室,上海市农业科学院食用菌研究所,上海,201106）
参考文献：
［1］Chang ST, Hayes WA. Volvariella volvacea. New York: Academic Press, 1978. 573～605.
［2］Graham GC, Henry RJ. Preparation of fungal genomic DNA for PCR and RAPD analysis. New York: R.Springer, 1996. 29～34.
［3］Chen MJ. Chiu SW. Chang ST. Conrstruction of a genomic library for Volvariella wlvacea.食用菌学报,1994,1(2):1～4.
［4］金冬雁,黎孟枫.分子克隆实验指南.北京:科学出版社,1992.75～166
