古尼虫草小孢变种无性型原生质体制备及再生条件的研究

古尼虫草小孢变种无性型原生质体制备及再生条件的研究 陈晓琳　 樊美珍　 李增智　 摘　要：以从古尼虫草小孢变种Cordyceps gunnii var.minor上分离的无性型古尼拟青霉小孢变种Paecilomyces gunnii var.minor G106M为出发菌株,进行原生质体制备及再生条件的研究.将培养16h的菌丝体用溶壁酶和蜗牛酶的混合酶液于28℃酶解1.5～2h,原生质体产量可达3.74×107/mL.以培养12h的菌丝制备的原生质体在0.6mol/L氯化钠的SDAY培养基上再生率最高,为17.92%. 关键词：虫草;虫生真菌;最佳再生条件;再生率 分类号：Q939.97　文献标识码：A 文章编号：1672-6472(2005)04-0533-0538 PREPARATION AND REGENERATION OF PROTOPLASTS OF PAECILOMYCES GUNNII VAR. MINOR CHEN Xiao-Lin　 FAN Mei-Zhen　 LI Zeng-Zhi　 基金项目：安徽省教育厅自然科学基金重点项目(编号:2002KJ110ZD) 作者简介：樊美珍,通讯作者,E-mail:mzfan@ahau.edu.cn 作者单位：陈晓琳（安徽农业大学,合肥,230036）　 　　　　　樊美珍（安徽农业大学,合肥,230036）　 　　　　　李增智（安徽农业大学,合肥,230036）　 参考文献： [1]Gao D, 1996. Microbiology Genetics. Shandong: Shandong University Press. 1～377 (in Chinese) [2]Li ZZ, Li CR< Huang B, Fan MZ & Lee MW, 1999. New variety of Cordyceps gunnii(Berk.) Berk. and its Paecilomyces anamorph. The Korea Journal of Mycology, 26 (1): 15～21 [3]Nong XQ, Wu ZK, BAO JZ, 1990. Studies on protoplast preparation and regeneration of Metarhizium anisopliae. Microbiology, 17 (2): 76～80 (in Chinese) [4]Deng CS, Wu ZK, Ye ZC, 1991. Studies on protoplast preparation and regeneration of Verticillium lecanii. Studies and Application of Entomogenous Fungi in China, 2:176～179 (in Chinese) [5]Xiang SH, 1989. Protoplast formation and regeneration of Geotrichum suaveolens. Journal of Microbiology, 9 ( 1 ): 24～30 (in Chinese) [6]Zhang HB, Ding HS, Cheng LZ, Sha T, 1999.Studies on protoplast preparation and regeneration of Aureobasidium pullulans.Journal of Yunnan University, 21 (3): 202～204 (in Chinese) [7]Zhou DP, Ping WX, 1990. Protoplast Fusion of Microorganisms. Heilongjiang: Heilongjiang Technology Press. 1～406 (in Chinese) [8]Riba G, 1978. Combinasion apres heteroceryose chez le champignon entomopathogene Paecilomyces fumosoroseus (Deuteromycete). Entomophaga,23:417～421 [9]Silveira WD, Azevedo JL, 1987. Protoplast fusion and genetic recombination in Metarhuzium anisopliae. Enzyme Microbiol Technol, 9: 149～152 [10]Pfeifer TA, Khachatourians GG, 1987. The formation of protoplasts from Beauveria bassiana. Appl Microbiol Biotechnol, 26:248～253 [11]高东,1996.微生物遗传学.山东:山东大学出版社.1～377 [12]农向群,吴正铠,包建中,1990.金龟子绿僵菌原生质体形成和再生的研究.微生物学通报,17(1):76～80 [13]邓春生,吴正凯,叶正楚,1991.蜡蚧轮枝孢原生质体形成和再生的研究.中国虫生真菌研究与应用,2:176～179 [14]向世华,1989.果香地霉原生质体的释放与再生.微生物学杂志,9(1):24～30 [15]张汉波,丁骅孙,程立忠,沙涛,1999.出芽短梗霉的原生质体形成及再生研究.云南大学学报(自然科学版),21(3):202～204 [16]周东坡,平文祥,1990.微生物原生质体融合.黑龙江:黑龙江科学技术出版社.1～402 菌物学报 2005年第4期-HTM文件 No.10