作者:山东菏泽科技开发中心,274002 任玉凤 杨晓峰 孙红 赵兴忠
食用菌母种是食用菌产品高产的关键,食用菌前两级菌种必须纯培养,如果污染了杂菌可试用以下方法。
细菌污染提纯法
1、材料含量为4万单位/mL的庆大霉素1支;经高压灭菌的PDA斜面培养基10支(试管规格18mm×180mm),无菌1mL注射器1支;6号针头1个。
2、方法在无菌箱内,把4万单位/mL的庆大霉素用无菌注射器分别注入1O支冷却至45℃左右的斜面试管培养基中,摇动培养基使之充分混匀,立即摆斜面。然后把被细菌污染的菌种以无菌操作方法移人该斜面培养基中,置25℃下培养。两次可把细菌甩掉,效果甚佳,对食用菌菌丝无抑制作用。
霉菌污染提纯法
1、 试管棉塞受湖污染了霉茼大都出现在斜面前端,可在酒精灯火焰连同培养基一起灼烧,使局部受热烤死霉菌。试管后半部用湿纱布包裹,然后转管。
2、 斜面中间出现霉茸用一块比霉菌稍大的滤纸,滴上甲醛或酒精,用无菌镊轻轻益在霉菌菌落上,可抑制霉菌生长,待食用菌菌丝伸展稍长,立刻转管,即得纯化菌丝。也可从污染较远的一端挑起少量菌丝,移植到新的斜面培养基前端,当菌丝萌发向外蔓延时,及时将种块连同培养基挖出。连续处理2~3次,可得纯化菌丝。此法也可用于处理放线菌的污染。
3、斜面出现霉茼严重时也可到药店购买制霉菌素片剂。把药片放在无菌水中片刻去掉糖衣后放入盛有10mL的小三角瓶中,操作方法同“细菌污染提纯法”第2点。两次可把霉菌甩掉。
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