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银耳的超声波介导转化

2005-07-11 00:000

银耳的超声波介导转化

Transformation of Tremella fuciformis by Using Ultrasonic Mediation

谢宝贵  饶永斌  郑金贵 

摘 要:以银耳(Tremellafuciformis)芽孢为实验材料,正交实验研究超声波处理时间、间歇时间及功率对转化率的影响.实验结果表明:超声波处理时间与间歇时间对质粒DNA和芽孢转化率都有显著影响;实验中质粒DNA转化率最高达到754.7个转化子/μg DNA,银耳芽孢转化率达到1.28‰;转化子的潮霉素抗性可达到200μg/mL,GUS检测阳性.

关键词:银耳;超声波介导转化;正交实验

基金项目:福建省科技项目(No.2001Z010)基金资助.

作者简介:谢宝贵:男,1962年生,博士,副教授.E-mail:<xbg@pub2.fz.fj.cn>.郑金贵:通讯作者.Author for correspondence.E-mail:<jinggui@fjau.edu.cn>.

作者单位:谢宝贵(福建农林大学生命科学学院,福州,350002;福建农林大学菌物研究中心,福州,350002) 

     饶永斌(福建农林大学生命科学学院,福州,350002;福建农林大学菌物研究中心,福州,350002) 

     郑金贵(福建农林大学农产品品质研究所,福州,350002) 

参考文献:

[1]Jia J H, Buaswell J A, Peberdy J F. Transformation of the edible fungi, Pleurotus ostreatus and Volvariella volvacea. Mycollogical Research, 1998, 102:876~880

[2]Jin D Y (金冬雁), Li M F (黎孟枫). Molecular Cloning: A Labo-ratoryManual (2ed). Beijing: Science Press, 1992.16~34 (in Chinese)

[3]Joersbo M, Brunstedt J. Sonication: A new method for gene transfer to plant. Physiology ofPlant, 1992, 85:230~234

[4]Lin W X (林维宣). Methord of Experiment Design. Dalian:Dalian Maritime Perils University Press, 1995. 134~ 191 (in Chinese)

[5]Miranda D. van de Rhee, Paula M A Graca, Henk J, Huizing and Hans Mooibroek. Transforma-tion of the cultivated mushroom, Agricus bisporus, to hy-grrnycin B resistance.Molecular and General Genetics, 1996, 250:252 ~258

[6]Sato T, Yaegashi K, Ishll S, Hirano T, Kajiwara S, Shishido K and Enel H. Transformation of the edible basidiomycete Lentinus edodes by restriction enzyme-mediat-ed integration of plasmid DNA. Bioscience Biotechnology Biochemistry,1998, 62:2346~2350

[7]Xie B G(谢宝贵), Zhu H(朱虎), Jiang Y J(江玉姬), Rao Y B (饶水斌) and Zhen J G (郑金贵). Ge-netic transformation markers of Tremella fuciformis. Joumal of Agricultural Biotechnology (农业生物技术学报), 2004, 12:610~611 (in Chinese with English abstract )

[8]Zhang L J(章力建),Cheng L M(陈乐玫),Yuan J(袁静), Li C G (李长公), Jia S R(贾士荣), Xu N(许宁) and Zhao N-M(赵南明). Ultrasonic direct gene transfer -the establishment of high ef-ficiency genetic transformation system for tobacco.Scientia Agricultura Sinica(中国农农业科学), 1991, 24 ( 2 ):83~89 (in Chinese with English abstract)

农业生物技术学报

JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY

2005 Vol.13 No.1 P.42-45

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