1、应用菌种：BI-B7菌株。
2、菌种质量标准及检验方法：
（1）外观标准：
①菌丝萌动初期为白色，随着生长发育逐渐变黄，后变黄褐色，进而颜色加深，最后呈明显的“三色”，外缘呈灰白色，向里呈浅黄色，中间呈黄褐色，斜面菌丝连接紧密，无断条状；菌落边缘整齐均匀。
②菌丝呈短绒毛状、毡状，菌苔厚、气生菌丝不发达。
③菌种保藏时间超过三个月后，菌落颜色加深呈深褐色，边缘变黑，有黑色代谢产物，部分呈瘤状物出现。
（2）镜检：挑取少许菌丝体，放在载玻片上，用美蓝染色，在1600倍镜头下观察，菌丝透明、粗壮、分枝较多，无锁状联合，美蓝单染色着色深，有大量生长点，无空泡，无杂菌污染。
（3）生理生化特征：
①生长最佳pH值为6.0～6.5；
②生长最适合温度为22℃±1～2℃；
③对氧的要求为好氧性。
（4）测定菌丝生长速度：将经分离获得的菌丝体块，置具PDA培养皿中央22℃±2℃培养，待菌丝向四周边缘辐射蔓延时，用测微尺每隔24h测定菌落直径，直至覆盖全皿为止，从而求出菌丝平均生长速度。如果菌丝生长迅速、整齐浓密、健壮有力，则表明为优良菌种；若菌丝生长缓慢或长速特快、稀疏无力、参差不齐、易于衰老，则表明为劣质菌种。
（5）吃料能力测定：将菌种接入最佳配方的原种培养料中，置于适宜的温湿度下培养，一周后，如果菌种块能很快萌发，并迅速向四周和培养料中生长伸展，则说明该品种的吃料能力强；反之，菌种块萌发后生长缓慢，迟迟不向四周和料层深处伸展，则表明该菌种对培养料的适应能力差
（6）Bi-B7均一性检测：将母钟接种于普通PDA培养基上，在最适宜培养条件下培养，其长相和长速差异不大，几乎无肉眼可见的区别，均一性较好。
（7）BI-B7稳定性检测：将母种接种于同一培养基上，在同等条件下培养，连续转管7次无明显变化，稳定性较好。
3、母种生产技术规程
（1）生产母种之前必须做出菇鉴定，不符合母种质量标准的不准投入生产。
（2）母种转试管培养基次数不超过5～7次，否则必须进行提纯复壮。
（3）培养基配制：
①配方：马铃薯200g、柞树木屑（或柞树皮）50g、葡萄糖10g、麦芽糖10g、琼脂25g、蛋白胨1g、酵母膏1g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁g克、VB综合6片、水1000ml、pH值自然；
②配制方法：按配方精确称量各种营养物质，将马铃薯去皮、挖眼、洗净，切成小方块（约1～1.5㎝左右），与柞树木屑按规定量定量称取，加水1000ml，进行煎煮，煮到熟而不烂，用四层纱布过滤取汁，再放入琼脂，边加热边搅拌，待琼脂完全溶化后，用湿纱布（二层）迅速过滤，取滤汁补足1000ml，再加其它营养物质煮沸，充分溶解后分装试管，分装试管时，要用玻璃漏斗进行分装试管，尽量避免培养基粘附管口，如培养基不慎粘着管口和管壁，要用纱布擦净，以免培养基粘住棉塞而引起污染，斜面装量为试管（20×200ml）长度的1/4。培养基分装好后，均要塞上棉塞，棉花用普通棉花制作，不宜使用脱脂棉，棉塞的大小、松紧要与试管口径相称，塞入试管的棉塞要紧贴管壁，不留缝隙，松紧度以提起棉塞而试管不脱落，拨出棉塞有轻微的声音为适宜。标准棉塞应是塞头略大，不易变形，入管的部分占塞总长的2/3，外露1/3为宜，然后按5支试管的数量捆住一捆，棉塞外包扎牛皮纸或双层报纸，以防棉塞受潮。
4、灭菌：将装培养基的试管置于高压灭菌锅中进行灭菌，装锅时，试管均要立放，切勿倾斜或平置，蒸气压力为1.5kg/㎝2，温度达121℃，保持30min，灭菌后，让其压力和温度自然下降以后，取出培养基按要求摆斜面，斜面长度以不超过空白管的2/3为宜，培养基冷却凝固，即成斜面培养基，放在25～28℃条件下，空白培养1～2d，检查无污染后备用。
5、接种：母种的接种操作一定要严格按照无菌操作规程进行，母种接种必须在接种箱或超净工作台进行，接种箱或超净工作台使用前用2%来苏儿或0.1%新洁尔灭擦拭，并用甲醛或过氧乙酸或气雾消毒盒消毒。甲醛用量为每立方米17ml加入14g高锰酸钾混合熏蒸；若用过氧乙酸，则每立方米空间用15ml，再加入75%的酒精8ml混合后加热熏蒸。接种前一小时打开紫外线灯照射，接种人员进入接种室则必须更换衣帽，接种前双手用75%酒精棉球擦拭，然后点燃酒精灯。接种工具要在酒精灯火焰上方严格灼烧。接种时，将一支斜面母种与另一支待接斜面培养基试管放在左手掌心，再用手指夹紧试管，右手拿接种针，将管口棉塞拨出，试管在火焰上灼烧2～3s，管口尽量靠近火焰的无菌区，将接种针迅速插入原始母种试管内，迅速挑取豆粒大小的一块菌丝体连同少量培养基，移入待接试管斜面培养基的中央。移菌时，不能让挑取的菌种接触管壁。取出接种针，将两个试管口在火焰上灼烧2～3s，棉塞塞入试管内部分也在火焰上微燎，并迅速塞入各自试管口。一支母种可扩大转接20支左右试管。转完一支母种，所有接种工具都要用酒精灯火焰再次灼烧，双手也重新用75%酒精棉球消毒。
6、培养：母种培养一般在恒温箱内进行，培养温度为22±2℃，湿度为50～60%，光线黑暗，经7～10d，菌丝可布满整个斜面，接种后的母种，必须每三天检查一次，有杂菌污染或菌丝生长表现异常的的进行淘汰和作好详细记录，达到母种质量标准的即可生产使用，若不立即使用，则应放在冰箱中在4℃情况下保存备用，每隔3～4个月转管一次或采用其它有效方法贮存。
7、母种必须设专人管理，详细作好档案记录，付出母种必须有严格的登记与签字手续。
