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组织分离新法,您不妨试一下

2010-12-09 15:305870
  【易菇论坛首发】 黑木耳、榆耳、灵芝等的组织分离,常规是切取组织块作分离材料,放在O.1%升汞溶液内进行表面消毒;或用75%乙醇作表面处理。用解剖刀将组织块切成绿豆粒大小的小块,接种到母种斜面培养基上,在合适的温度下培养。这种分离法成功率相对偏低。无菌操作要严格。主要原因是黑木耳耳片难取,成功率低;灵芝子实体易木质化;榆耳取快稍不注意容易污染。此常规方法比较费工、费时、不易操作,如果组织块表面消毒不彻底,易污染,导致分离失败。
  这几年,我在实验室对这种常规方法进行了改进。采用黑木耳、榆耳、灵芝母种培养、菌种瓶2-3级种培养时长出的原基进行组织分离,其成功率很高,可以达到100%。具体做法是:将这些种培养时长出的原基。在扩接母种时,将长有原基的菌种试管和培养基试放进超净台内或接种箱内,若用接种箱则用甲醛高锰酸钾熏蒸后,再经紫外线消毒30分钟后,开始工作。在母种扩接前,先将原基,用接种钩取绿豆粒大小的小块,移接到斜面培养基上。组织分离后,再将母种进行扩接。经培养后对比,组织分离的菌种试管。明显优于菌丝扩接的试管,菌丝健壮、浓白,整齐一致,生长速度快。这种方法适合在试管和菌种瓶容易现原基的食用菌品种。有兴趣的同仁不妨尝试一下。参考文献略【作者myb转载请注明来源于易菇论坛】
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