谢宝贵; 卢启泉; 饶永斌; 孙淑静; 郑金贵
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【中文摘要】 用PCR法合成人胰岛素基因,克隆到pUC18载体上,经测序证实其碱基序列与人胰岛素基因的序列完全一致。本实验还构建了银耳表达载体,由限制性内切酶介导(Restriction enzy me-mediated DNA Integration,REMI)转化银耳芽孢。随机挑取21个抗性菌落,转管繁殖2代后检测其GUS活性,实验结果:18个菌株阳性,3个菌株阴性。从这21个菌株中选取10个菌株,提取染色体DNA,用人胰岛素基因、GUS基因和Tnos序列的特异引物进行PCR,结果表明,这10菌株都能扩增出相应长度的特异片段,证明了它们是人胰岛素基因转化子。
【中文关键词】 人胰岛素; 基因合成; 基因转化; 银耳; 芽孢
【基金】国家自然科学基金项目“银耳生物反应器基础研究”(No30471210);; 福建省卫生教育联合攻关计划项目“银耳生物反应器生产人胰岛素的研究”(NoWKL2005-2-009)的部分研究内容
【文献出处】 食用菌学报,Acta Edulis Fungi,编辑部邮箱,2007年02期 【DOI】CNKI:SUN:SYJB.0.2007-02-000