刘世强; 郭丽琼; 林俊芳; 郭安平
中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室; 中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室; 中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室; 中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室 海口571701 ; 海口571701; 华南农业大学食品学院生物工程系; 广州510640 ; 海口571701; 华南农业大学食品学院生物工程系; 广州510640 ; 海口571701
【中文摘要】 从金针菇(Flammulina velutipes)7个菌株中筛选出1株高产植酸酶菌株。根据GenBank中植酸酶基因的保守区设计并合成一对特异性引物,以金针菇菌丝的总DNA为模板,通过PCR扩增,获得了一条长约790bp的片段。DNA序列测定结果表明,该片段长度为788bp,采用Blast软件进行序列比对发现,该片段与平田头菇(Agrocybe pediades)的植酸酶基因phy(GenBankAccession:CAC48160)编码的氨基酸具有64%的序列同源性。该片段含有2个内含子,含有植酸酶基因的活性位点高度保守序列(Active-site sequence)-RHGXRXPT[1]。
【英文摘要】 One Flammulina velutipes strain producing high yield of phytase was screened from seven Flammulina velutipes strains.The phytase gene region was cloned by PCR amplification from Flammulina velutipes genomic DNA with a pair of specific primers designed according to the conserved sequence of phytase genes in the GenBank.DNA sequencing determination results showed that the fragment length was 788bp.Sequence analysis with Blast software indicated that the deduced amino acid sequence was 64% of homology with the amino acid sequence of phytase gene phy(GenBank Accession:CAC48160) from Agrocybe pediades.The fragment contained two introns and the active-site high-degree conserved sequence of phytase genes-RHGXRXPT.
【中文关键词】 金针菇; 植酸酶; 筛选; 克隆
【英文关键词】 Flammulina velutipes; Phytase; Screen; Clone
【基金】国家自然科学基金资助项目“草菇冷冻胁迫诱导表达基因及其启动子的克隆分离”(编号:30060054);; “食用菌外源基因表达系统的建立”(编号:30371000)的部分研究内容
【文献出处】 食用菌学报,Acta Edulis Fungi,编辑部邮箱,2005年03期 【DOI】CNKI:SUN:SYJB.0.2005-03-000