糙皮侧耳中产孢相关基因同源物stpo1的克隆及表达分析

【作者】戚元成 李建立 邱立友 申进文 王瑞霞
【机构】河南农业大学生命科学学院 上海市农业科学院食用菌研究所农业部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心上海市农业遗传育种重点实验室
摘要：根据肺形侧耳(Pleurotus pulmonarius)产孢相关基因stpp1,采用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)技术克隆出糙皮侧耳(P.ostreatus)产孢相关基因同源物stpo1全长,并对其保守域进行生物信息学分析,使用pEASY-E2原核表达系统进行该基因的原核表达,通过荧光定量PCR分析stpo1表达模式。结果表明:糙皮侧耳stpo1全长cDNA序列为2556bp,预测编码851个氨基酸的蛋白质,具有错配修复DNA结合域(MUTSd)、ATP结合位点(ABC-ATPase)以及错配修复域(MutS),属于错配修复家族。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示stpo1在原核细胞中具有表达活性,定量PCR显示stpo1在糙皮侧耳不同发育阶段显现不同的表达水平并且在成熟子实体菌褶中的表达量明显高于其它部位,表明该基因可能与糙皮侧耳的孢子形成有相关性。
基金：国家现代农业产业技术体系专项资金(CARS-24)； 河南省高等学校重点科研项目(13B180051)； 河南省高等学校重点科研项目(14A180023)资助；
关键词：糙皮侧耳; 产孢相关基因stpo1; RT-PCR; 原核表达; 表达模式;