【作者】吴茵 陈敏 郭倩
【机构】浙江工商大学食品与生物工程学院
【摘要】分离纯化刺芹侧耳Pleurotus eryngii芳基醇氧化酶,并探究其酶学性质。通过硫酸铵盐沉、DEAE-Sepharose Fast Flow弱阴离子交换层析、Sephacryl S-200 High Resolution凝胶过滤层析和Source 15Q强阴离子交换层析,得到纯化的单一酶。经肽指纹图谱鉴定,确定其为芳基醇氧化酶,酶活回收率25.5%,纯化倍数38.2。结合SDS-PAGE和IEF-PAGE分析,确定其分子量和等电点分别为70k Da和4.2。以藜芦醇为底物,该酶最适反应p H为6.0,最适反应温度为70℃,金属离子Zn2+、Fe2+和Cu2+对芳基醇氧化酶的活性抑制作用明显,Km和Vmax分别为0.921mmol/L和80U/mg。
【基金】浙江省科技厅专项(2014C33027)~~；
【关键词】刺芹侧耳; 芳基醇氧化酶; 柱层析; 藜芦醇;