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蛹虫草金属硫蛋白分离纯化及性质研究

2019-01-22 17:081690菌物学报
【作者】张琪 程显好 郭文娟 刘凤红 王朝霞
【机构】鲁东大学菌物科学与技术研究院天津工业大学环境与化工学院
【摘要】研究探讨锌离子胁迫下蛹虫草Cordyceps militaris金属硫蛋白的产生及性质。蛹虫草菌丝体以15g/L Zn2+在10L发酵罐中诱导培养56h后收集,产率为每升发酵液收集12.021g菌丝体(干重),细胞破碎取上清液通过两次凝胶柱层析,冷冻干燥得到蛹虫草金属硫蛋白纯品。利用Bradford法进行蛋白质含量测定,用银饱和分析法结合原子吸收光谱(AAS)测定MT含量,发酵终点处金属硫蛋白含量为12.876mg/g菌丝体(湿重)。用电喷雾质谱法测得金属硫蛋白的分子量为7 390Da,用Ellman’s方法和火焰原子吸收法分别测得每分子蛋白质含有14个巯基、结合5个Zn原子。氨基酸组成分析结果显示,每分子蛋白质共含57个氨基酸,其中含有13个半胱氨酸,疏水氨基酸占29.8%,且含有组氨酸。以上表明,研究中的蛹虫草金属硫蛋白与哺乳动物金属硫蛋白结构差异较大,但与酵母菌金属硫蛋白结构组成类似。  
【基金】山东省自然科学基金联合专项(No.ZR2010CL005); 烟台市科技发展计划项目(No.2011069);
【关键词】蛹虫草; 金属硫蛋白; 锌诱导; 氨基酸组成;
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