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酿酒酵母3-磷酸甘油脱氢酶的诱导、提纯和性质

2018-01-03 10:472160菌物学报
【作者】蔡敬民;Markus Pietzsch;Manfred Rizzi;
【机构】合肥联合大学;斯图加特大学;斯图加特大学 合肥 230022;斯图加特 70569 德国;
【摘要】在YEPD培养基中添加NaCl,可以诱导酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞内3-磷酸甘油脱氢酶的形成,当NaCl浓度达5%时,酶比活从0.05U/mg提高0.5U/mg;若再限制培养墓中葡萄糖浓度在100mg/L以下,酶比活可达到0.89U/mg。酶比活与培养基中的NaCl浓度的函数关系式为:Sa=0.129C3-0.038C2+0.034C+0.063(0≤C≤5%)。粗酶液经Sephadex G-25凝胶过滤,Blue Sepharose亲和层析以及Mono Q离子交换等步骤,提纯123.6倍,得纯酶液。经SDS-凝胶电泳测得分子量为45000±2000。酶的最适温度为51℃,最适pH值为6.8。保温30分钟的半失活温度(t1/2)为41℃。NADH和DHAP的Km(mmol/L)值分别为:0.017和0.134。   
【关键词】酿酒酵母;3-磷酸甘油脱氢酶;酶的诱导;提纯和性质;
【基金】德国下萨克森州科艺部资助;
【分类号】TS261;
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