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依赖于DNA的RNA聚合酶与体外转录的研究——Ⅱ.酵母变异株20B-12 RNA聚合酶B的纯化及鉴定

2017-12-19 17:190菌物学报
【作者】张渝英;刘年娟;帅克;杨开宇;
【机构】中国科学院微生物研究所;中国科学院微生物研究所;北京;北京;北京师范大学84届毕业生;
【摘要】从酵母变异株20B-12经过超声波处理、硫酸铵沉淀、DEAE纤维素、磷酸纤维素和DEAE-Sephadex层析等步骤,纯化依赖于DNA的RNA聚合酶B,在聚丙烯酰胺凝胶电泳中呈二条有聚合酶B活力的区带。其中不含有DNase、RNase和蛋白酶活力,无内源DNA。50μg/ml的α-鹅膏蕈碱抑制聚合酶活力达90%以上。最适(NH4)2SO4浓度为40mM。最适Mn2+浓度为2mM。Mg2+对酶B无激活作用。变性DNA对酶B较天然DNA有更高的效率。 
【关键词】依赖于DNA的RNA聚合酶;酿酒酵母变异株20B-12;RNA聚合酶的纯化;
 
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