培养基是食用菌生长需要的营养基质。根据试验或生产的需要常把菌种分为母种、原种、生产种。培养基必需含有菌体生长的所有营养物质，每种物质有适当的浓度比例，适宜的酸碱度。制备培养基的物质可因地制宜，来源广，安全，无毒，成本低而适当选用。培养基要经严格灭菌，保证无菌状态才可使用，以达到食用菌纯培养的目的。下面例子介绍培养基的制备方法。
一、母种：马铃茨蔗糖琼脂培养基
马铃茨200克 蔗糖15克 酵母膏0.2克
维生素B1 0.1克 琼脂20克 水加至1000毫升 酸碱度7.2―7.4
把马铃茨去皮后称取200克，洗干净切片加适量水煮沸15分钟，双层纱布过滤取清液，得马铃茨汁。茨汁加入20克琼脂加水至1000毫升煮到琼脂熔化，再加入蔗糖、酵母膏、B1，边加边搅拌，并注意补水至1000毫升，用5%盐酸或10%氢氧化钠调酸碱度至7.2―7.4。趁热分装三角瓶要定量或试管，每管约装管长的1/5―1/4为宜。包扎好，写标签。在摄氏115度下灭菌20分钟，试管灭菌后摆斜面。
二、原种：麦粒种
麦粒87克，碳酸钙2克，干粪粉6克，谷壳5克。
做法：去什的麦粒称取87克，洗干净后浸水8小时，冬天用暖水浸，加水到麦粒表面，旺火煮20分钟。要求麦粒不裂皮，无白心。稍凉后滤去水分，拌入粪粉、碳酸钙、谷壳，拌匀，趁热装入750毫升菌种瓶，约装瓶身的3/4量，用干净布抹干净瓶口，包扎好，写标签。摄氏121度灭菌30分钟。
三、生产种：粪草种
粪干粉49克，麦杆（稻杆）碎49克，石膏2克，水适量。
做法：粪干磨成粉状，草料切成5厘米长，加入石膏粉，边拌边洒水，加水至手捏指间有水分渗出但不成水滴为宜。把拌匀的料埋堆，加塑料膜覆盖，堆沤3天，料堆发热，把料摊开、翻匀，再埋堆，如此反复进行，至草料金黄色变软为适合，装入750毫升菌种瓶，装至瓶身的3/4，用干净布抹干净瓶口，包扎好，写标签，摄氏121度灭菌30分钟。
以上介绍的几种培养基的配制方法，可随时随地因物品的变化而适当改变，如马铃茨可用胡萝卜、豆芽汁代用，草料可用木屑，破籽棉代用。粪干可用麸皮、米糠、玉米粉、黄粉等代用，同样有良好的效果。
